NWC

Цоликлоны

Все, что вам нужно знать об определении группы крови и резус-фактора цоликлонами

Содержание



Современное и надежное определение группы крови использует технологии на основе цоликлонов, являющихся мировым "золотым стандартом". Принцип этого метода основан на выявлении реакций агглютинации между антигенами на эритроцитах и соответствующими специфическими антителами в реагенте. Определение группы крови и резус-фактора может проводиться в качестве первичной или подтверждающей диагностики посредством цоликлонов Anti-A, Anti-B и Anti-D.

Цоликлоны – это солевые растворы моноклональных антител, используемые для обнаружения антигенов в человеческой крови, что упрощает и стандартизирует процесс типирования, обеспечивая четкую интерпретацию результатов реакции антиген-антитело. В этой статье рассмотрены цоликлоны, метод их применения, как врачи проводят анализ, интерпретация результатов, условия хранения и информация о том, где можно приобрести цоликлоны.

Что же такое цоликлоны?

Цоликлоны представляют собой жидкий реагент с готовыми моноклональными антителами к антигенам, расположенным на поверхности эритроцитов человека. Эти антитела получают с использованием гибридом или специфических штаммов бактерий. Название препаратов происходит от Центрального ордена Ленина института клинической онкологии в Москве, который сейчас является Гемато-онкологическим научным центром Росздрава.

Моноклональные антитела Анти-А и Анти-В производятся двумя гибридомами мышей и относятся к иммуноглобулинам класса М. Цоликлоны изготавливаются из асцитической жидкости мышей-носителей гибридом анти-А и анти-В. Технология производства реагента исключает возможность его загрязнения патогенными для человека вирусами.

Определение проводится в нативной крови, крови взятой на консерванте, в крови, взятой без консерванта, в крови, взятой из пальца. Используется метод прямой гемагглютинации на плоскости: на планшете или слайде.

Цоликлоны выпускаются в жидкой форме в пластиковых флаконах объемом 10 мл с капельницей или в стеклянных флаконах объемом 5 мл. Срок годности составляет до 2-х лет при температуре хранения от 2 до 8°C.

Цоликлоны используются для определения групп крови в системе ABO, заменяя или используясь в сочетании с иммунными сыворотками. Они производятся из асцитической жидкости мышей и содержат специфические иммуноглобулины, направленные против антигенов А и В человека. Цоликлоны доступны в жидкой форме во флаконах по 5 мл и 10 мл, с тремя типами: Цоликлон анти-А (anti-A), Цоликлон анти-В (anti-B) и Цоликлон анти-АВ (anti-AB).

Коллоиды (цоликлоны) являются продуктами гибридомных клеточных линий, полученных в результате слияния антигенформирующих В-лимфоцитов мыши с клетками миеломы мыши. Отдельные гибридомные клеточные линии производят однородные антитела одного класса иммуноглобулина, которые структурно и биологически идентичны.


Принцип действия цоликлонов


Цоликлоны представляют собой моноклональные антитела, используемые для определения группы крови и резус-фактора. Принцип их действия основывается на реакции агглютинации, которая происходит при контакте антител с антигенами на поверхности эритроцитов. Важно отметить, что этот метод позволяет быстро и точно определить группу крови и резус-фактор, что особенно ценно в ситуациях, требующих срочного переливания крови.

Определение группы крови с помощью цоликлонов


На специальную планшету наносится большая капля (0.1 мл) каждого цоликлона.

Рядом с каждым цоликлоном добавляется маленькая капля (0.01-0.03 мл) крови пациента.

Смесь оставляют на 3 минуты для наблюдения за реакцией агглютинации.

Результаты определяются следующим образом:
- Агглютинация с анти-A говорит о принадлежности к группе А. Агглютинация с анти-B указывает на группу B.
- Отсутствие агглютинации с обоими указывает на группу 0. Агглютинация с обоими анти-A и анти-B свидетельствует о группе AB.



Определение резус-фактора с помощью цоликлона anti-D


Большая капля (0.1 мл) цоликлона anti-D смешивается с маленькой каплей (0.01 мл) крови пациента.

Смесь наблюдают в течение 3 минут на предмет агглютинации.

Результаты интерпретируются так:
- Агглютинация указывает на Rh+.
- Отсутствие агглютинации свидетельствует о Rh-.

Методика анализа крови с использованием цоликлонов включает смешивание образца крови с моноклональными антителами и наблюдение за реакцией. Результаты основываются на наличии или отсутствии агглютинации (слипания) эритроцитов, где "+" обозначает наличие агглютинации (присутствие антигена), а "-" отсутствие агглютинации (отсутствие антигена).

Эти реагенты должны храниться в закрытом виде, при температуре от 2 до 8°C, чтобы избежать уменьшения активности антител при высыхании; температура воздуха в помещении должна быть между 15 и 25°C. Продукты компании зарегистрированы и сертифицированы в соответствии с российскими нормами.

Набор оборудования для определения группы крови цоликлонами


Для точного и эффективного определения группы крови и резус-фактора с использованием метода цоликлонов требуется специализированное оборудование и реагенты. В этом разделе представлен перечень необходимых инструментов и материалов, которые используются в процессе типирования крови.

Основные реагенты и оборудование


Цоликлоны: включают Цоликлон Анти-A, Цоликлон Анти-B, Цоликлон Анти-D, а также Цоликлон Анти-AB для комплексного определения группы крови. Реагенты доступны в жидкой форме во флаконах по 5 мл и 10 мл.

0.9% раствор натрия хлорида: используется для разбавления крови перед проведением теста.

Специальная планшета для типирования: необходима для размещения капель реагентов и крови.

Стерильные аппликаторы: используются для нанесения крови и реагентов на планшет.

Ланцеты одноразового использования: необходимы для получения образца крови.


Дополнительное оборудование


Градуированные лабораторные пипетки: для точного дозирования реагентов и образцов крови.

Стеклянные палочки и шарики: используются для перемешивания крови с реагентами.

Песочные часы или таймер: для контроля времени реакции.

70% этиловый спирт: для стерилизации и очистки рабочей поверхности.

Пинцеты и пробирки: для манипуляций с образцами и реагентами.


Условия хранения и сроки годности Цоликлонов


  • Реагенты и цоликлоны должны храниться в холодильнике при температуре от 2 до 8°C.
  • Неоткрытые флаконы сохраняют свои свойства в течение 2 лет.
  • Открытые флаконы можно хранить в холодильнике до одного месяца, при условии их герметичности.

Использование указанного оборудования и соблюдение рекомендаций по хранению обеспечивают высокую точность и надежность результатов при определении группы крови и резус-фактора.

Подготовка к анализу


Прежде чем приступить к анализу крови цоликлонами, важно тщательно подготовиться, чтобы обеспечить точность результатов. Подготовка к анализу включает несколько ключевых шагов.


Сбор образца крови


Выбор метода сбора крови: Кровь для анализа может быть взята из пальца или вены. Важно, чтобы последний прием пищи был не менее, чем за 4 часа до сдачи крови.

Подготовка пациента: Рекомендуется проводить анализ утром, натощак, после минимум 4 часов поста и до любых других медицинских процедур.


Подготовка рабочего места


Освещение и температура: Обеспечьте адекватное освещение и поддерживайте температуру в помещении от 15 до 25 °C для оптимальных условий работы с реагентами.


Проведение анализа


Маркировка лунок планшета: Необходимо четко промаркировать лунки на планшете, куда будут добавляться реагенты: Анти-A, Анти-B, Анти-AB.

Добавление реагентов: В соответствующие лунки добавляют по капле реагентов Анти-A, Анти-B, Анти-AB.

Добавление крови: В каждую лунку добавляют небольшое количество исследуемой крови.

Смешивание реагента с кровью: Используя стерильную стеклянную палочку (для каждой лунки своя палочка!), тщательно перемешайте кровь с реагентом.

Время реакции: Планшету аккуратно покачивают в течение 2,5-3 минут для обеспечения полноценной реакции.

Оценка результатов: Результаты анализируют визуально в каждой лунке после завершения времени реакции.

Соблюдение этих процедур и условий является ключом к точному определению группы крови и резус-фактора, что особенно важно в случаях, требующих срочного переливания крови или оперативных медицинских вмешательств.

Пошаговый алгоритм определения группы крови


Для точного определения группы крови и резус-фактора с использованием цоликлонов важно следовать четкому алгоритму. Ниже представлены пошаговые инструкции, которые помогут провести анализ правильно и получить надежные результаты.


Подготовка материалов и оборудования


Цоликлоны: Подготовьте необходимые реагенты - Цоликлон Анти-A, Цоликлон Анти-B и Цоликлон Анти-D.

Планшет для анализа: Используйте специальную планшету, предназначенную для типирования крови.

Стерильные аппликаторы и пипетки: Обеспечьте наличие стерильных инструментов для нанесения крови и реагентов.


Определение группы крови


Нанесение реагентов: На планшете разместите по одной большой капле (0.1 мл) Цоликлона Анти-A и Цоликлона Анти-B.

Добавление образца крови: Рядом с каждым реагентом добавьте по маленькой капле (0.01-0.03 мл) крови пациента.

Смешивание и наблюдение: Аккуратно перемешайте кровь с реагентами и наблюдайте за реакцией в течение 3 минут. В случае сомнений добавьте 1 каплю 0.9% раствора натрия хлорида.


Определение резус-фактора


Нанесение Цоликлона Анти-D: На планшету нанесите большую каплю (0.1 мл) Цоликлона Анти-D.

Добавление крови и наблюдение: Добавьте маленькую каплю (0.01 мл) крови пациента рядом с реагентом, перемешайте и наблюдайте реакцию в течение 3 минут.


Интерпретация результатов


Группа A (II): Агглютинация с Анти-A.

Группа B (III): Агглютинация с Анти-B.

Группа 0 (I): Отсутствие агглютинации с Анти-A и Анти-B.

Группа AB (IV): Агглютинация с обоими Анти-A и Анти-B.

Резус-фактор Rh+: Агглютинация с Анти-D.

Резус-фактор Rh-: Отсутствие агглютинации с Анти-D.

Следуя этим шагам, можно точно и эффективно определить группу крови и резус-фактор, что крайне важно для клинических целей и в ситуациях, требующих срочного переливания крови.

Заключение

В современной медицинской практике определение группы крови и резус-фактора с помощью цоликлонов стало одним из наиболее точных и быстрых методов. Этот процесс имеет решающее значение во многих клинических ситуациях, требующих срочного переливания крови или проведения операций. Цоликлоны обеспечивают точную диагностику благодаря высокой специфичности моноклональных антител, позволяя определить как основную группу крови, так и резус-фактор, что подчеркивает их незаменимость в медицинских лабораториях по всему миру.

С учетом проведенного анализа, понимание механизма действия цоликлонов, их правильного хранения и приобретения является важной частью для обеспечения качественной диагностики и лечения пациентов. Обширное применение цоликлонов в клинической практике подчеркивает их значимость и надежность как в экстренных, так и в плановых ситуациях. Этот метод продолжает оставаться золотым стандартом в определении группы крови, предоставляя точные и быстрые результаты, что немаловажно для спасения жизней.


По всем вопросам заказа и приобретения звоните и пишите: