Слабый D и подгруппа А2: выявление и трансфузионная тактика. NWC. КОМПАНИЯ СЕВЕРО-ЗАПАД

Слабый (вариантный) антиген D и подгруппа A2 — две классические причины ошибок при определении групповой принадлежности. Оба случая прямо урегулированы действующими нормативными актами: постановлением Правительства РФ № 641 от 14.05.2025 и приказом Минздрава России № 215н от 27.03.2026.

Что такое вариантный антиген D

Правила, утвержденные постановлением Правительства РФ от 14 мая 2025 г. № 641, вводят понятие «вариантные антигены» — антигены, при наличии которых определяется слабая агглютинация со стандартными реагентами к антигенам групп крови. Применительно к системе Rh это означает эритроциты, несущие антиген D в сниженном количестве или в измененной форме: со стандартными анти-D реагентами такие образцы дают слабую реакцию или не дают ее вовсе при обычной постановке.

Резус-принадлежность при этом Правила определяют предельно однозначно: наличие или отсутствие на эритроцитах антигена D. Отсюда практическая проблема — образец с вариантным D формально может быть ошибочно отнесен к резус-отрицательным.

Нормативные требования к выявлению вариантного D

Постановление Правительства РФ № 641, пункт 34: во время донации отбираются образцы крови для определения групп крови по системе AB0, резус-принадлежности, при этом определение вариантного антигена D является обязательным. Исследование вариантного антигена D, как и антигенов C, c, E, e, K, проводится дважды от разных донаций; при совпадении результатов антигены считаются установленными и при последующих донациях не определяются.

Приказ Минздрава России № 215н, приложение № 4 к Порядку (в силе с 1 января 2027 года):

резус-принадлежность устанавливается как положительная при наличии антигена D и как отрицательная при его отсутствии;
образцы крови доноров, показавшие отрицательный результат с реактивами, содержащими анти-D IgM антитела, дополнительно исследуют с реактивами, содержащими анти-D IgG антитела;
доноры, имеющие варианты антигена D, считаются резус (D)-положительными;
при первой и второй донации в одной организации определение вариантов антигена D является обязательным наряду с антигенами C, c, E, e, K и k.

Логика нормы понятна: донор с вариантным D относится к резус-положительным, поскольку его эритроциты способны иммунизировать резус-отрицательного реципиента.

Практическая схема выявления вариантного D

Этап 1. Определение антигена D реагентом, содержащим анти-D IgM антитела (прямая агглютинация).
Этап 2. При отрицательном результате — исследование реагентом, содержащим анти-D IgG антитела; такие антитела не вызывают прямой агглютинации и выявляются в непрямом антиглобулиновом тесте либо реагентом смешанного состава.
Этап 3. Интерпретация: выявление антигена D на втором этапе означает вариантный D; донор относится к резус-положительным.

Реагентное обеспечение схемы: Anti-D (моноклональный, человеческий IgM) для первого этапа и Anti-D blend (моноклональный, человеческий IgG+IgM) для второго. Обе позиции представлены в номенклатуре Antitoxin GmbH, поставляемой NWC. Дополнительно доступен Anti-CDE incomplete (поликлональный, человеческий).

Формат гелевых карт удобен для этого исследования: колоночная агглютинация облегчает чтение слабоположительных реакций, а карта с антиглобулиновым реагентом позволяет поставить непрямой антиглобулиновый тест в один этап. Подробнее — в статье «Расширенное обязательное типирование антигенов у доноров в гелевых картах».

Отдельно Правила № 641 допускают в целях профилактики реакций и осложнений применение методов генотипирования — в случае затруднений при определении группы крови по системе AB0, резус-принадлежности и антигенов C, c, E, e, К (пункт 90).

Подгруппа A2 и экстраагглютинины анти-A1

Антиген A неоднороден: подгруппа A2 отличается от A1 меньшим количеством антигенных детерминант и иной их структурой. Клиническое значение имеет то, что у лиц с группой крови A2 или A2B могут присутствовать экстраагглютинины анти-A1 — естественные антитела, направленные против антигена A1. Именно так это понятие определено в Правилах № 641.

Типичное лабораторное проявление — расхождение результатов прямого и перекрестного (обратного) определения группы крови по системе AB0.

Как выявляют подгруппу A2

Приложение № 4 к Порядку, утвержденному приказом № 215н, пункт 7, подпункт «а», описывает алгоритм:

группа крови по системе AB0 определяется прямым методом (реагенты анти-A и анти-B) и перекрестным методом со стандартными эритроцитами A1, B; при исследовании на плоскости используются также стандартные эритроциты группы 0;
в каждую серию исследований включаются «положительный» и «отрицательный» контрольные образцы;
в случае расхождения результатов прямого и обратного определения (выявление экстраагглютинина анти-A1) для определения подгруппы антигена A используют реагент анти-A1.

Реагентное обеспечение: Anti-A1 (Dolichos biflorus Lectin) — лектин, реагирующий с антигеном A1 и не реагирующий с A2, и Anti-H (A2) (моноклональный, человеческий) — реагент к антигену H, экспрессия которого на эритроцитах A2 выше, чем на A1. Дополнительно в номенклатуре присутствует Anti-AHp (Helix pomatia Lectin). Реагенты Anti-A1 и Anti-H (A2) выпускаются в том числе в исполнении для гелевых карт.

Трансфузионная тактика при подгруппе A2

Для донора. Пункт 37 Правил № 641: выявление при исследовании в образце крови донора экстраагглютинина анти-A1 является основанием для запрета клинического использования крови и ее компонентов; допускается передача компонентов для иных, кроме клинического использования, целей. Аналогично, приложение № 4 к Порядку (приказ № 215н) устанавливает, что при выявлении в образце крови донора аллоиммунных антител к антигенам эритроцитов и (или) экстраагглютинина анти-A1 передача заготовленных от данной донации компонентов для клинического использования не осуществляется.

Для реципиента. Пункт 91 Правил № 641: реципиентам с экстраагглютининами анти-A1 переливают эритроцитсодержащие компоненты, не содержащие антиген A1, а именно:

реципиенту с группой крови A2 — эритроцитсодержащие компоненты группы 0;
реципиенту с группой крови A2B — эритроцитсодержащие компоненты группы 0 или группы B.

Почему это важно

И вариантный D, и подгруппа A2 — это ситуации, в которых формально корректно выполненное «обычное» исследование дает клинически неверный результат. Ошибка в определении вариантного D у донора ведет к риску иммунизации резус-отрицательного реципиента; нераспознанный экстраагглютинин анти-A1 — к трансфузии несовместимых эритроцитов. Именно поэтому оба случая вынесены в нормативные акты отдельными нормами, а лаборатория должна иметь под рукой не только базовый набор анти-A, анти-B и анти-D, но и реагенты второй линии.

Минимальный набор для разбора этих ситуаций: Anti-D (IgM), Anti-D blend (IgG+IgM), Anti-A1 (Dolichos biflorus Lectin), Anti-H (A2), стандартные эритроциты A1, B и 0. Все реагенты доступны в каталоге NWC; регистрационное удостоверение на медицинское изделие Antitoxin — № ФСЗ 2011/09750.

По всем вопросам заказа и приобретения звоните и пишите:

(812) 777-06-05 (812) 248-34-48 info@nwcspb.ru

Слабый D и подгруппа А2: вариантные антигены, их выявление и трансфузионная тактика