При переливании крови и ее компонентов обязательно проводится резус-типирование, поскольку несовместимость по резус-фактору может вызвать серьезные осложнения, включая гемолитическую болезнь новорожденных. Традиционные методы фенотипирования зачастую не позволяют обнаружить слабые или частичные варианты антигена D, что может привести к ошибочным результатам. Цоликлоны, представляющие собой моноклональные антитела человеческого происхождения, помогают преодолеть эту проблему.

Основные преимущества использования цоликлонов

Цоликлоны обладают рядом существенных преимуществ по сравнению с сывороточными реагентами:

• Высокая чувствительность и специфичность - цоликлоны способны выявлять слабые и частичные варианты антигена D, обеспечивая более точные результаты.
• Стандартизированное качество - моноклональные антитела производятся в строго контролируемых условиях, что гарантирует их однородность и воспроизводимость результатов.
• Отсутствие интерференции с другими антителами - цоликлоны не взаимодействуют с неспецифическими антителами, присутствующими в сыворотках.
• Безопасность - исключается риск передачи инфекционных агентов, характерный для сывороточных реагентов.

Механизм действия цоликлонов
Цоликлоны представляют собой моноклональные IgM-антитела человека, специфичные к антигену D эритроцитов. Они вызывают агглютинацию клеток, несущих антиген D, в том числе его слабые и частичные варианты (за исключением DVI). Положительный результат проявляется в образовании четко различимыхм выраженных агглютинатов.

Применение цоликлонов для фенотипирования
Цоликлоны используются для первичного определения резус-фактора в реакции прямой агглютинации. Процедура может проводиться на плоскости (планшете)или в пробирке.

Типирование на плоскости

• Нанесите большую каплю цоликлона и рядом – маленькую каплю эритроцитов.
• Смешайте капли стеклянной или пластиковой палочкой(для каждой лунки своя палочка!).
• Подождите 10-15 секунд, затем плавно покачайте планшет в течение 20-30 секунд.
• Оцените результат через 3 минуты. При наличии антигена D образуются крупныевыраженныеагглютинаты.

Определение в пробирке

• Приготовьте 5% взвесь эритроцитов в физрастворе.
• Добавьте в пробирку цоликлон и эритроциты, перемешайте.
• Инкубируйте 30 минут при комнатной температуре или 37°С.
• Центрифугируйте 1 минуту при 1500-2000 об/мин.
• Оцените наличие агглютинатов на фоне прозрачного раствора.

Дополнительное тестирование
В случае первичного отрицательного результата у доноров проводят выявление антигена DVI с помощью цоликлона в реакции конглютинации с желатином или в антиглобулиновомтесте. Для реципиентов дополнительный анализ не требуется.

Преаналитический этап
Для исследования подходят образцы нативной крови, стабилизированной консервантами, а также кровь без антикоагулянта, в том числе из пальца. Образцы хранятся до 3 суток при температуре 2-8°С. Перед началом тестирования обеспечьте яркое освещение и температуру воздуха 18-25°С.

Интерпретация результатов
При положительном результате образуются один или несколько крупных агглютинатов на фоне прозрачного раствора. Отрицательный результат - непрозрачная гомогенная взвесь эритроцитов.

Клиническое значение
Точное фенотипирование по резус-фактору имеет решающее значение для предотвращения гемолитических осложнений при переливании крови и гемолитической болезни новорожденных. Применение цоликлонов позволяет избежать ошибок, связанных с неспособностью обычных сывороточных реагентов выявлять слабые и частичные варианты антигена D.

Стандартизация и контроль качества
Производство цоликлонов осуществляется в строго контролируемых условиях с соблюдением требований надлежащей производственной практики (GMP). Каждая серия проходит тщательный контроль качества, включая тестирование на специфичность, чувствительность и отсутствие перекрестных реакций.

Регистрация и нормативная база
Цоликлоны для определения резус-фактора зарегистрированы в качестве медицинских изделий и разрешены к применению на территории Российской Федерации. Их использование регламентируется действующими нормативными документами, в частности:

• Постановлением Правительства РФ №986 от 04.07.2020
• Постановлением Правительства РФ №797 от 22.06.2019
• Приказом Минздрава России №1134н от 20.10.2020
• Приказом Минздрава России №1166н от 28.10.2020

Применение цоликлонов для определения резус-фактора обеспечивает высокую точность и безопасность результатов, позволяя выявлять слабые и частичные варианты антигена D. Эти инновационные реагенты полностью соответствуют современным требованиям к качеству и стандартизации медицинских изделий для трансфузионной медицины.